El microbioma vegetal incluye bacterias patógenas, simbióticas, epífitas y endófitas. Los endófitos colonizan las plantas internamente, a menudo en la región intercelular, sin causar efectos adversos. Las bacterias endófitas son cada vez más reconocidas en la producción de cultivos debido a su utilidad potencial como agentes en la promoción del crecimiento de las plantas, el alivio del estrés y la fitorremediación.
Plátano (Musa sp.) forma un importante cultivo de frutas y alimentos en todo el mundo. Dado que el banano comercial ya no contiene semillas viables, la micropropagación es de vital importancia. El verdadero tallo de esta planta herbácea es el cormo subterráneo, mientras que las vainas de las hojas constituyen el pseudotallo. El ápice del brote profundamente asentado, protegido del exterior por numerosas bases de hojas, forma el material de partida para la micropropagación en banano, una práctica ahora comúnmente adoptada para la rápida multiplicación clonal de tipos élite. Los estudios que emplean bananos cultivados en tejidos y cultivados en el campo han indicado una asociación generalizada de endófitos bacterianos predominantemente en una forma no cultivable en poblaciones micropropagadas.
Un documento reciente en AoB PLANTS demuestra la aplicación de pruebas de viabilidad de bacterias vivas/muertas con imágenes confocales en secciones de tejido fresco como una herramienta simple y eficiente para documentar bacterias endófitas nativas, y también mostró una colonización bacteriana extensa en el espacio perimetral entre la pared celular y la membrana plasmática en el región de la punta de los brotes en crecimiento del banano. Los microorganismos, presentes en números innumerables, comparten una asociación profunda e integral con el huésped, pero muestran beneficios aparentemente mutualistas sin ningún efecto adverso o patógeno evidente sobre el huésped. Las observaciones reportadas aquí abren el camino a más investigaciones en profundidad sobre la asociación e interacciones planta-endofito.
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Thomas, P., y Reddy, KM (2013) Elucidación microscópica de abundantes bacterias endofíticas que colonizan el espacio entre la pared celular y la membrana plasmática en el tejido de la punta del brote del banano. AoB Plants 5: plt011 doi: 10.1093/aobpla/plt011
Este estudio tuvo como objetivo generar evidencia microscópica de colonización intratejido en banano para respaldar los hallazgos previos sobre la asociación generalizada de bacterias endófitas con las puntas de los brotes de plantas cultivadas en el campo y cultivos micropropagados, y comprender el alcance de la colonización de tejidos. Secciones de tejido de la vaina de la hoja (∼50–100 µm) de puntas de brotes recogidas asépticamente de cv. Los Grand Naine se trataron con los componentes del kit de viabilidad bacteriana Live/Dead SYTO 9 (S9) y yoduro de propidio (PI) seguidos de epifluorescencia o microscopía de barrido láser confocal (CLSM). El S9, que se dirige a bacterias vivas, mostró abundantes partículas verdes fluorescentes a lo largo de la periferia de la célula huésped en CLSM, aparentemente entre la membrana plasmática y la pared celular. Estos incluyeron células bacterianas individuales no móviles y ocasionalmente móviles activamente vistas en diferentes planos x-y y pilas z sobre varias capas de células, con una señal de fluorescencia similar a la de cultivos puros de endófitos de banano. El yoduro de propidio, que tiñe las bacterias muertas, no detectó ninguna, pero después del tratamiento con etanol, tanto el PI como el 4′,6-diamidino-2-fenilindol detectaron abundantes bacterias. El yoduro de propidio mostró una tinción nuclear clara, al igual que S9 hasta cierto punto, y los fluoróforos parecían detectar bacterias con exclusión de los orgánulos de plantas que contenían ADN, tal como se obtuvieron de la microscopía de contraste de fase y de campo brillante. La tinción S9-PI no funcionó satisfactoriamente con tejido fijado con formalina o paraformaldehído. La extensa colonización bacteriana en tejido fresco se confirmó aún más con los retoños de diferentes cultivares y se confirmó mediante microscopía electrónica de transmisión. Por lo tanto, este estudio proporciona evidencia microscópica clara de la extensa presencia de bacterias endófitas en el periespacio confinado de la pared celular y la membrana plasmática en el tejido del brote de banano con los organismos compartiendo una asociación integral con el huésped. La abundante colonización de tejidos sugiere una posible participación de los endófitos en la biología del huésped, además de reconocer el periespacio de la membrana plasmática de la pared celular como un nicho importante para las bacterias asociadas a las plantas.
