Esta videoblog desde http://www.AoBBlog.com se trata de una de las prácticas de Biología Celular y del Desarrollo que dirijo en la Universidad de Leicester para el curso #BS1003. Se trata de la infección de rodajas de raíz de zanahoria con tres cepas de Agrobacterium, dos de los cuales hacen que las células vegetales se dividan. Un video anterior mostró cómo configuramos las culturas www.youtube.com/watch?v=mS6OjCekrNo ; aquí revisamos los resultados y miramos el Agrobacterium estructura del plásmido.
La función videoblog se ve mejor en HD 1080 si tiene una conexión rápida a Internet; enlace corto es http://youtu.be/7V5Zdxsds5s.
Ciertos patógenos pueden interrumpir dramáticamente el desarrollo de las plantas. Aquí, vimos cómo el patógeno bacteriano, Agrobacterium tumefaciens, causa tumores en tejidos vegetales diferenciados al activar la división celular. El proceso implica la transferencia de genes bacterianos a los cromosomas de la planta en los sitios de las heridas, lo que da como resultado la transformación genética de las células de la planta que luego se dividen de manera descontrolada porque han incorporado los genes para la producción de hormonas en las células de la zanahoria. Estos genes están ubicados en una molécula de ADN circular presente en el tipo salvaje Agrobacterium tumefaciens Conocido como T37. Este es el plásmido Ti, de unos 206,000 pb de longitud. La parte que se transfiere al ADN nuclear de la zanahoria se conoce como ADN-T y contiene los genes que producen las hormonas que inducen la división celular. Un grupo diferente de genes, tanto para hormonas como para el control del desarrollo vegetal, está presente en Agrobacterium rizogenes y estos conducen a la producción de raíces diferenciadas a partir de las células de la zanahoria en el sitio de la herida (en nuestro caso, el corte) del tejido radicular. La tercera cepa de Agrobacterium tumefaciensque usamos era similar al tipo salvaje T37 pero le habían quitado los genes para la producción de hormonas.
Folleto práctico Introducción:
Proliferación celular y organogénesis mediada por Agrobacterium
Introducción
El desarrollo de plantas y animales puede ser perturbado por enfermedades. Tanto las plantas como los animales pueden sufrir enfermedades oncogénicas, en las que se pierde el control normal sobre la división celular y se forman tumores. En las plantas, especies de la bacteria del suelo. Agrobacterium causar síntomas de enfermedad en plantas infectadas que se caracterizan por tumores, la llamada enfermedad de Crown Gall (Agrobacterium tumefaciens) o por la producción aberrante de 'raíces peludas' (Agrobacterium rizogenesLos síntomas de la enfermedad se deben a la transferencia desde la bacteria y la expresión en el núcleo de la planta de genes transportados en una molécula circular de ADN (un plásmido, el plásmido Ti, «inductor de tumores», o el plásmido Ri, «inductor de raíces»,), tras la escisión y transferencia de parte de dicho plásmido. Esta transferencia de genes de la bacteria a la planta representa una forma natural de ingeniería genética y se ha explotado experimentalmente para modificar el crecimiento, el desarrollo y el metabolismo de las plantas, tanto con fines de investigación básica como aplicada.
Los tejidos tumorales vegetales se caracterizan por la capacidad de crecer en medios carentes de hormonas, ya que los genes transferidos de las bacterias a las células vegetales codifican genes que promueven la síntesis de auxinas y citoquininas.
Emparejamiento
En este experimento, inoculará tejidos vegetales (raíces primarias de zanahoria) con tres cepas diferentes de Agrobacteriumy estudiar los efectos sobre el tejido infectado. Los explantes se mantendrán en un medio de cultivo mínimo que no contenga hormonas añadidas. Por lo tanto, cualquier callo u otro crecimiento de los explantes estará determinado por el efecto transformador de las bacterias.
LBA4404 [control] = un 'desarmado' A. tumefaciens cepa (que carece de genes de biosíntesis de hormonas).
T37 = un tipo salvaje A. tumefaciens tensión.
LBA9402 = un tipo salvaje A. rizogenes tensión.
RESUMEN DE RESULTADOS
En las zanahorias que se usaron como control, sin infección con el Agrobacterium, ha habido una cantidad mínima de división celular en las células de la superficie y el tejido parece ligeramente seco. En las zanahorias con la denominada cepa desarmada, LBA4404, también hubo un crecimiento y una división mínimos de las células. Los otros dos tienen una extensa división y proliferación celular, en el caso de Agrobacterium rizogenes, diferenciándose para formar raíces.
En una de las conferencias sobre biotecnología, hablé un poco más sobre la estructura del ADN-T y otro clip que subiré pronto mostrará partes grabadas en vivo de esta conferencia, resumiendo parte del material discutido anteriormente y en este video.
